Purificación en un solo paso de la vacuna viva atenuada contra el virus de la rabia
La rabia es una enfermedad vírica prevenible que suele transmitirse por la mordedura de un animal rabioso. El virus de la rabia infecta el sistema nervioso central de los mamíferos, causando en última instancia una enfermedad en el cerebro y la muerte (CDC). En hasta 99% de los casos, los perros domésticos son responsables de la transmisión del virus de la rabia a los humanos. Sin embargo, la rabia puede afectar tanto a animales domésticos como salvajes. Se transmite a las personas por mordeduras o arañazos, generalmente a través de la saliva. Sin la vacuna antirrábica, la tasa de letalidad es de casi 100% cuando se infectan humanos y animales domésticos. (Organización Mundial de la Salud). Las vacunas antirrábicas son el método más eficaz para proteger a las personas y a los animales de compañía cuando están expuestos.
En comparación con la purificación tradicional de la vacuna antirrábica (separación por membrana y exclusión por tamaño), los medios Biopure AF de Biovanix pueden purificar el virus vivo atenuado de la rabia en un solo paso con una mejor recuperación y pureza de la proteína vírica.
Pruebas de purificación de la vacuna antirrábica
Resultado
- Recuperación > 80%
- Pureza > 90%
- Índice de eliminación de impurezas > 99%
Condición de prueba:
- Columna: Columna preempaquetada VirCap® AF de 1 ml
- Fase móvil A: 10mM PB pH7.4
- Fase móvil B: 10mM PB pH7.4 2M NaCl
- Caudal: 0,5 ml/min
- Pruebas: UV 280nm
- Muestra: Medio vírico clarificado
Utilizando el análisis HPSEC para las pruebas de la solución de muestra, el fluido de percolación y el fluido de recogida, y sin pico de diana en la ruptura a RT=10min. El medio Biopure AF eluye las partículas de virus cambiando la fuerza iónica en la fase móvil. Tanto la pureza como la concentración del virus mejoran significativamente.
También se realizan pruebas paralelas de análisis HPSEC para la recogida de picos de objetivos entre los competidores.
PIC y autorización
La frecuencia de la limpieza in situ (CIP) depende de las propiedades y condiciones del disolvente.
Para la etapa de captura, suponemos al menos 30 minutos de proceso CIP en contracorriente con NaOH 1 M después de cada pasada.
Para reducir la contaminación microbiana en la columna preempaquetada, límpiela con NaOH 0,5 a 1,0 M, se recomienda 1 h de tiempo de contacto.
Otro método de purificación del virus de la rabia
Purificación por cromatografía del virus inactivo de la rabia
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