Purification en une étape d'un vaccin vivant atténué contre le virus de la rage
La rage est une maladie virale évitable qui se transmet le plus souvent par la morsure d'un animal enragé. Le virus de la rage infecte le système nerveux central des mammifères, provoquant à terme une maladie du cerveau et la mort (CDC). Dans 99% des cas, les chiens domestiques sont responsables de la transmission du virus de la rage à l'homme. Cependant, la rage peut toucher aussi bien les animaux domestiques que les animaux sauvages. Elle se transmet à l'homme par morsure ou griffure, généralement par la salive. Sans vaccin antirabique, le taux de mortalité est proche de 100% lorsque les humains et les animaux domestiques sont infectés. (Organisation mondiale de la santé). Les vaccins contre la rage sont la méthode la plus efficace pour protéger les humains et les animaux domestiques lorsqu'ils sont exposés.
Par rapport à la purification traditionnelle du vaccin contre la rage (séparation par membrane et exclusion de taille), le milieu Biopure AF de Biovanix peut purifier le virus de la rage vivant atténué en une seule étape, avec une meilleure récupération des protéines virales et une plus grande pureté.
Tests de purification du vaccin antirabique
Résultat
- Récupération > 80%
- Pureté > 90%
- Taux d'élimination des impuretés > 99%
Condition d'essai :
- Colonne : Colonne VirCap® AF 1ml pré-conditionnée
- Phase mobile A : PB 10mM pH7.4
- Phase mobile B : PB 10mM pH7.4 NaCl 2M
- Débit : 0,5 ml/min
- Test : UV 280nm
- Échantillon : Milieu viral clarifié

En utilisant l'analyse HPSEC pour les tests de la solution d'échantillon, du liquide de percolation et du liquide de collecte, et aucun pic de la cible dans le breakthough à RT=10min. Le milieu Biopure AF élue les particules de virus en changeant la force ionique dans la phase mobile. La pureté et la concentration du virus s'améliorent de manière significative.
Des tests parallèles de l'analyse HPSEC pour la collecte des pics cibles sont également effectués par les concurrents.


CIP et apurement
La fréquence des nettoyages en place (NEP) dépend des propriétés et des conditions du solvant.
Pour l'étape de capture, nous supposons qu'il faut au moins 30 minutes de NEP à contre-courant avec du NaOH 1 M après chaque passage.
Pour réduire la contamination microbienne dans la colonne préemballée, nettoyer avec 0,5 à 1,0 M NaOH, un temps de contact de 1 h est recommandé.
Une autre méthode de purification du virus de la rage
Purification par chromatographie du virus de la rage inactif