Ионообменные фазы для селективности жидкостной хроматографии
Ионообменные фазы разделяют растворители на основе различий в ионном заряде. Удержание в ионообменной хроматографии определяется рН элюента, природой и ионной силой буфера и температурой. Эффективность колонок ниже, чем в обращенно-фазовой ВЭЖХ. Элюенты обычно водные, но могут содержать некоторые органические компоненты.
Материал основания
Существуют ионообменники как на основе кремнезема, так и на основе полимеров. В первом случае ионы прикрепляются к поверхности кремнезема, а во втором - ионообменные группы распределены по всей матрице. Материалы на основе кремнезема обладают механической прочностью и более высокой эффективностью, в то время как материалы на основе полимеров отличаются большей стабильностью рН.
Приложения
Ионообменники используются для анализа малых ионов, но ключевой областью применения этого метода является разделение биомолекул, таких как пептиды, белки и олигонуклеотиды. Слабые ионообменники используются для анализа неорганических ионов, этот метод более точно называется ионной хроматографией.
Ионообменная способность
Обменная емкость ионообменника является важной мерой его удерживающей способности (обычно измеряется в миллиэквивалентах на грамм материала). Для любой колонки необходимо также учитывать плотность упаковки фазы. Материалы с широкими порами обычно имеют более низкую ионообменную емкость.
Катионообменные фазы содержат отрицательно заряженные функциональные группы и удерживают положительно заряженные катионы. И наоборот, анионообменные фазы удерживают отрицательно заряженные аналиты за счет положительно заряженных функциональных групп. На приведенных ниже схемах ионная сила противоионов может быть изменена для изменения положения равновесия и, следовательно, времени удерживания аналитов.
Классификация
Тип | Прочность | Номенклатура | Типовая функциональность | Диапазон ионизации pH |
Анион | Слабый | WAX | Амин | Ионизированный при определенном pH |
Сильный | SAX | Четвертичный аммоний | Ионизированный в полном диапазоне pH | |
Катион
| Сильный | SCX | Сульфоновая кислота | |
Слабый | WCX | Карбоновая кислота | Ионизированный при определенном pH |
Ионообменные фазы Biovanix
Фаза | Материал основания | Классификация | Размер частиц | Вместимость | Диапазон pH |
ПММА SP50 | Полимер | SCX | 50um | ≥130 мг Лизоцим | 2-12 |
ПММА Q50 | SAX | 50um | ≥130 мг Лизоцим | 2-12 | |
PSDVB POLY S50 | SCX | 50 мкм | ≥ 60 мг/мл hlgG | 2-12 | |
PSDVB POLY CM50 | WCX | 50 мкм | ≥80 мг Лизоцим | 6-12 | |
PSDVB POLY Q50 | SAX | 50 мкм | ≥ 100 мг BSA | 2-12 | |
PSDVB POLY D50 | WAX | 50 мкм | ≥ 100 мг BSA | 2-9 |